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目的基因导入宿主细胞



录入时间:2023-10-7 16:18:21 来源:青岛海博生物

  目的基因与载体在体外连接重组后形成重组DNA分子,必需导入到适当的宿主细胞进行繁殖,才能使目的基因得到大量扩增或表达。随着基因工程的发展,从低等的原核细胞,到简单的真核细胞,进一步到结构复杂的高等动植物细胞都可以作为基因工程的受体细胞。外源重组DNA分子能否有效地导人受体细胞,取决于所选用的宿主细胞类型、克隆载体结构和基因转移方法等因素。

  带有外源DNA片段的重组子在体外构建后,需要导人适当的宿主细胞进行繁殖。才能获得大量而且一致的重组体DNA分子,这一过程叫做基因的扩增。因此,选定的宿主细胞必须具备使外源DNA进行复制的能力,而且还应能表达由导人的重组体分子所提供的某些表型特征,以利于含转化子细胞的选择和鉴定。

  将外源重组DNA分子导人受体细胞的方法很多,其中转化(转染)和转导主要适用于原核的细菌细胞和低等真核细胞(酵母),显微注射和电穿孔则主要应用于高等动植物的真核细胞。

 

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