一、用途及试验原理:
该培养基用于O157选择性增菌(ISO方法)。
胰酪蛋白胨和大豆蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;三号胆盐和新生霉素可抑制革兰氏阳性菌的生长;磷酸氢二钾是培养基pH缓冲剂;葡萄糖作为可发酵的糖类。
添加剂:每瓶需配套添加6盒HB0106-1新生霉素4.5 mg使用。每支添加于225 mL的mTSB肉汤中。
二、培养基配方(g/L):
胰酪蛋白胨 |
17.0 |
大豆蛋白胨 |
3.0 |
氯化钠 |
5.0 |
三号胆盐 |
1.5 |
磷酸氢二钾 |
4.0 |
葡萄糖 |
2.5 |
pH值7.3±0.2(25℃) |
三、试验方法:
1. 称取本品33.0g,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中,分装每瓶225mL,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,加入1支新生霉素溶液(4.5mg),混匀,备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。
3. 选择适宜稀释度的菌悬液接种于培养基中。
4. 放置于41.5℃±0.5℃需氧培养18h-24h,观察试验结果。
四、试验结果判断:
接种以下质控菌株,放置于41.5℃±0.5℃需氧培养18h-24h,试验结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
大肠杆菌O157 |
ATCC 35150 |
10-100 |
+++ |
生长良好,浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
生长良好,浑浊 |
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
100-1000 |
- |
不生长,澄清 |
质控菌株接种量计数结果:
图1 mTSB肉汤微生物质控结果
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