一、用途及试验原理：
该培养基用于酿造和工业发酵过程中细菌、酵母菌和霉菌培养。
胰蛋白胨和酵母浸粉提供微生物生长所需的碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖作为可发酵的糖类；磷酸二氢钾是培养基pH缓冲剂；氯化钾、氯化钙、硫酸镁和三氯化铁提供微生物生长所需的离子；溴甲酚绿为培养基的酸碱指示剂；琼脂为培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
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胰蛋白胨 |
5.0 |
|
酵母浸粉 |
4.0 |
|
葡萄糖 |
50.0 |
|
磷酸二氢钾 |
0.425 |
|
氯化钾 |
0.125 |
|
氯化钙 |
0.125 |
|
硫酸镁 |
0.0025 |
|
三氯化铁 |
0.0025 |
|
溴甲酚绿 |
0.022 |
|
琼脂 |
20.0 |
|
pH值5.5-5.8（25℃） |
|
三、试验方法：
1. 称取本品80.0 g，加热溶解于1000 mL蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，待冷却至50℃-55℃倾入无菌平皿，备用。
2. 10倍梯度稀释法制备质控菌株菌悬液。
3. 取100 μL质控菌液涂布接种于待测培养基和TSA上。
4. 放置于30℃-35℃需氧培养48 h-72 h，观察试验结果。
四、试验结果判断：
接种以下质控菌株，放置于30℃-35℃需氧培养48 h-72 h，试验结果如图1所示。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
回收率 |
生长情况 |
其他特征 |
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酵母菌 |
ATCC 18700 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
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白色念珠菌 |
CMCC(F) 98001 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色至淡黄色菌落 |
|
伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色至淡黄色菌落 |
|
黑曲霉 |
CMCC(F) 98003 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有黑色孢子 |
图1 WLN培养基微生物质控结果
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