一、用途及试验原理
本培养基一般用于滤膜法检测和计数水中的肠球菌。
胰蛋白胨、蛋白胨、酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;牛胆汁可以抑制大部分革兰氏阳性菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;叠氮钠抑制其他非目标菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
17.0 |
蛋白胨 |
3.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
牛胆汁 |
10.0 |
氯化钠 |
5.0 |
七叶苷 |
1.0 |
柠檬酸铁铵 |
0.5 |
叠氮钠 |
0.15 |
琼脂 |
13.0 |
pH 7.0±0.1(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品55.65g,加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。
2、制备质控菌株,接种到该培养基中。
3、放置于36℃±1℃恒温培养箱中,需氧培养22h-26h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置35℃恒温培养箱中,需氧培养22h-26h。结果如图1所示。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 (CFU) |
参比或计 数培养基 |
方法 |
质控结果 |
粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
TSA |
定量 |
褐色菌落,周围变黑 |
屎肠球菌 |
ATCC 27270 |
10-100 |
TSA |
定量 |
褐色菌落,周围变黑 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
定性 |
抑制 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
/ |
/ |
定性 |
部分抑制 |
图1 胆汁七叶苷叠氮钠琼脂的微生物质控结果
五、注意事项
培养基中有少量柠檬酸铁铵,灭菌后可能有微量黑色沉淀,摇匀倒平板即可正常使用。
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