一、试验原理及用途
本培养基用于生活饮用水及其水源水中的大肠埃希氏菌的测定。
胰蛋白胨提供碳氮源;三号胆盐抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;乳糖是可发酵的糖类;磷酸氢二钾和磷酸二氢钾为缓冲剂;氯化钠可维持均衡的渗透压。大肠埃希氏菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide 简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366 nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
二、培养基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
20.0 |
乳糖 |
5.0 |
三号胆盐 |
1.5 |
磷酸氢二钾 |
4.0 |
磷酸二氢钾 |
1.5 |
氯化钠 |
5.0 |
MUG |
0.05 |
pH6.9±0.2(25℃) |
三、试验方法
1、称取本品37.0 g,加热溶解于1000 mL蒸馏水中,分装,115℃高压灭菌20分钟,备用。
2、制备菌种悬液,接种到EC-MUG培养基中。
3、放置于44.5℃±0.5℃恒温培养箱中,需氧培养24 h-48 h。
四、质控结果
接种以下质控菌株,放置于44.5℃±0.5℃恒温培养箱中,需氧培养24h-48h。培养结果见图1。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
其他特征 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
有荧光 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
1000-5000 |
- |
抑制 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
+++ |
无荧光 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
+++ |
有荧光 |
大肠埃希氏菌 |
CMCC(B) 44102 |
10-100 |
+++ |
有荧光 |
图1 EC-MUG培养基的微生物质控结果
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