一、用途及原理
该培养基用于FDA标准中大肠埃希氏O157菌的选择性增菌培养。
蛋白胨、酪蛋白水解物、酵母浸粉提供细菌生长所需的基本营养,磷酸氢二钠、磷酸二氢钾维持培养基pH的相对稳定,乳糖和丙酮酸钠可做为碳源促进大肠埃希氏O157菌的生长,吖啶黄素、万古霉素和头孢磺啶可抑制大多数的革兰氏阳性菌及部分革兰氏阴性菌的生长。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
10.0 |
氯化钠 |
5.0 |
磷酸氢二钠 |
3.6 |
磷酸二氢钾 |
1.5 |
酪蛋白水解物 |
5.0 |
乳糖 |
10.0 |
丙酮酸钠 |
1.0 |
酵母浸粉 |
6.0 |
吖啶黄素 |
0.01 |
万古霉素 |
0.008 |
头孢磺啶 |
0.01 |
pH |
7.2±0.2 |
三、配制方法
称取本品42.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min,冷却后备用。
称取25g样品加入至225mL培养基中混匀,37±1℃培养5h后,向培养基中加入1支mBPWp添加剂1(含吖啶黄素2.25mg,万古霉素1.8mg)和1支mBPWp添加剂2(含头孢磺啶2.25mg),转置42±1℃培养18-24h。
四、生长现象及结果观察
接种以下质控菌株,在36±1℃下培养18-24小时:
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量/CFU |
生长现象 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
浑浊 |
鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
浑浊 |
大肠埃希氏O157菌 |
ATCC35150 |
10-100 |
浑浊 |
金黄色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
1000-5000 |
不生长 |
铜绿假单胞菌 |
ATCC27853 |
1000-5000 |
不生长 |
mBPWp培养基试验现象
(从左至右依次为大肠埃希氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠埃希氏O157菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)
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