【原理】
万古霉素能抑制革兰氏阳性菌,多粘菌素B对革兰氏阴性菌(除变形杆菌外),均有强烈的抑制作用,但两种抗菌素对奈氏菌属均无抑制作用,故便于在咽喉标本中分离脑膜炎球菌。
卵黄用以供给脑膜炎球菌营养,在缺乏血源的地方,可代替兔或羊等动物的血源,淀粉可除掉琼脂或蛋白胨中抑制脑膜炎球菌的毒性物质。
【成分】
2%营养琼脂(pH7.4~7.6已灭菌)
1000ml
可溶性淀粉
2g
50%卵黄生理盐水
80ml
万古霉素
3.3mg
多粘菌素B
25000u
【制法】
1.2%营养琼脂:将牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g溶于1000ml蒸馏水中,置水浴煮沸溶解,调整至pH7.4~7.6,121℃灭菌15分钟,冷却后,置冰箱备用。
2.50%卵黄生理盐水:将新鲜鸡蛋洗净,浸泡于70%~75%酒精中半小时或外表用2%~3%碘酒消毒处理,然后用无菌纱布拭干后,于蛋壳两端对开两小孔,使蛋清及蛋白全部流出后,再将蛋黄倾入已灭菌盛玻璃珠的烧瓶内,用力振摇,量取等量卵黄及生理盐水混匀,即成50%卵黄生理盐水。
3.抗生素:准确按量称取万古霉素和多粘菌素B,溶解于5ml无菌蒸馏水中。
4.卵黄双抗培养基:
(1)将可溶性淀粉2g加入2%的营养琼脂1000ml内加热煮沸溶解;
(2)冷却至55℃左右加入50%卵黄生理盐水80ml,边加边摇,然后加入上配制的抗生素5ml,混匀,倾皿制成平板基。
【用途】
适于脑膜炎带菌调查分离培养用。
【注意事项】
1.此培养基不能久置,一般在2周内用完,否则,过久会失去抑菌作用。
2.应选择新鲜鸡蛋为宜,因培养基易被霉菌污染。
3.多粘菌素B可用多粘菌素E代替。
4.接种标本后,要置于5%CO2缸中培养。
(湖南省衡阳医学院第二附属医院检验科 周常冬供稿)
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