一、试验原理
用于海生细菌的培养和计数。
蛋白胨、酵母粉为微生物的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子,满足细菌生长的需求;各种无机盐提供与海水相似的环境,适合海生细菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L)
蛋白胨 |
5.0 |
酵母粉 |
1.0 |
柠檬酸铁 |
0.1 |
氯化钠 |
19.45 |
氯化镁 |
5.98 |
硫酸钠 |
3.24 |
氯化钙 |
1.8 |
氯化钾 |
0.55 |
碳酸钠 |
0.16 |
溴化钾 |
0.08 |
氯化锶 |
0.034 |
硼酸 |
0.022 |
硅酸钠 |
0.004 |
氟化钠 |
0.0024 |
硝酸铵 |
0.0016 |
磷酸氢二钠 |
0.008 |
琼脂 |
15.0 |
pH 7.6±0.2 25℃ |
三、试验方法
1、称取本品52.4 g,加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃时,倾入无菌平皿。
2、制备质控菌液涂布接种到培养基中。
3、放置于20℃-25℃恒温培养箱中需氧培养40 h-72 h。
四、结果观察
接种以下质控菌株,放置于20℃-25℃恒温培养箱中需氧培养40 h-72 h。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC 17802 |
20-200 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
哈氏弧菌 |
ATCC 14126 |
20-200 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
霍乱弧菌 |
/ |
20-200 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
图1 2216E琼脂培养基微生物质控结果
注:该培养基无机盐成分较多,灭菌前的溶解很关键,先加入水,边搅拌边缓慢加入干粉,不要让干粉成团;倒平板之前,应充分摇匀。
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