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阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂)原理及使用方法

李令梅
录入时间:2021-8-24 14:17:20 来源:青岛海博生物

一、培养基用途及原理:
  用于婴儿配方奶粉和其它食品中阪崎肠杆菌的快速检测。

  阪崎肠杆菌显色培养基是青岛海博生物公司根据GB4789.40生产的培养基,胰蛋白胨、大豆蛋白胨提供营养,氯化钠维持渗透压,琼脂为凝固剂,脱氧胆酸钠主要抑制革兰氏阳性菌的生长,柠檬酸铁铵、硫代硫酸钠可使产硫化氢的非目标菌呈黑色中心,阪崎肠杆菌可特异性分解底物5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙使菌落显蓝—绿色,其它不产硫化氢、不分解底物的菌一般显无色或黄色。


二、培养基配方(g/L):

胰蛋白胨
15.0
大豆蛋白胨
5.0
氯化钠
5.0
柠檬酸铁铵
1.0
硫代硫酸钠
1.0
脱氧胆酸钠
1.0
5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙
0.1
琼脂
15.0
pH 7.3±0.2 25℃


三、试验方法:
  1. 称取本品8.62g加入200ml蒸馏水,加热煮沸完全溶解,121℃高压灭菌15min,冷至50℃左右时,倾入无菌平皿。制备好的平板保存于2-8℃,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,室温保存。
  2. 使用前,把制备好的平板放置室温10-20分钟。
  3. 制备质控菌液。
  4. 选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml,均匀涂布于平板及参比平板上,每一稀释度每种接种两个平板。
  5.用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环,将接种环接触容器边缘3次去除多余液体,在平板表面划六条平行直线,同时接种两个平板。
  6. 36±1℃倒置培养基培养18-24小时,记录实验结果。

四、结果观察与解释 :

  接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

质控菌株
菌株编号

接种量

(CFU)

参比或计

数培养基

方法

质控评

定标准

其他特征
阪崎肠杆菌
ATCC29004
20-200
TSA
定量
PR≥0.5
蓝绿色菌落
金黄色葡萄球菌
ATCC25923
/
/
半定量
G≤1
/
大肠埃希氏菌
ATCC25922
/


/
黄色菌落
伤寒沙门氏菌
ATCC14028
/
/
定性
/
无色菌落,有黑色中心
肺炎克雷伯氏菌
ATCC10031
/


/
无色菌落 





图1-2  阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂)微生物质控结果

备注:a:阪崎肠杆菌,b: 金黄色葡萄球菌,c: 肺炎克雷伯氏菌,d:伤寒沙门氏菌,e:大肠埃希氏菌
五、注意事项:

  本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。



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注:本文属海博生物原创,未经允许不得转载。

 

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