一、培养基用途及原理
用于药品中耐胆盐革兰氏阴性菌的检验。
明胶胰酶水解物、酵母浸出粉提供细菌生长的基本营养，脱氧胆酸钠可抑制革兰氏阳性菌的生长，在酸性条件下脱氧胆酸盐可沉淀析出；结晶紫可抑制革兰氏阳性菌及部分真菌的生长；葡萄糖为唯一碳源，氯化钠维持渗透压，琼脂为凝固剂，中性红为酸碱指示剂，酸性条件下为红色，碱性条件下为橙黄色。
耐胆盐革兰氏阴性菌可在此培养基中生长，部分细菌可分解葡萄糖产酸，菌落显桃红色，周围有胆盐沉淀环，产酸弱或不产酸的细菌可呈现淡红色或橙黄色，菌落周围通常没有沉淀环。
二、培养基配方（g/L）
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明胶胰酶水解物 |
7.0 |
|
酵母浸出粉 |
3.0 |
|
脱氧胆酸钠 |
1.5 |
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葡萄糖 |
10.0 |
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氯化钠 |
5.0 |
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中性红 |
0.03 |
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结晶紫 |
0.002 |
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琼脂 |
15.0 |
| pH7.4±0.2 | 25℃ |
三、试验方法
1、称取本品41.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸不要超过2分钟，无需高压灭菌。冷却至50℃左右时，混匀倾入无菌平皿，临用时制备不得超过3小时。制备好的平板保存于2-8℃，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，室温保存。使用前，把制备好的平板放置室温10-20分钟。
2、制备质控菌液。
3、选择合适稀释度的目标菌质控菌液0.1ml，均匀涂布于平板上，每一稀释度接种两个平板。
4、30-35℃倒置培养基培养18-24小时，记录实验结果。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，30-35℃倒置培养基培养18-24小时：
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
生长情况 |
回收率 |
其他特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
CMCC(B)44102 |
10-100 |
+++ |
≥70% |
红色菌落，有胆盐沉淀环 |
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金黄色葡萄球菌 |
CMCC(B)26003 |
/ |
- |
/ |
抑制 |
|
铜绿假单胞菌 |
CMCC(B)10104 |
10-100 |
+++ |
≥70% |
淡红色菌落至橙黄色菌落 |
紫红胆盐葡萄糖琼脂微生物质控结果：
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铜绿假单胞菌 淡红色菌落至橙黄色菌落 |
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大肠埃希氏菌 红色菌落，有胆盐沉淀环 |
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金黄色葡萄球菌 抑制 |
五、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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