一、培养基用途
本培养基用于革兰氏阴性肠杆菌的分离培养。
二、试验原理
牛肉粉、蛋白胨为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素；乳糖是可发酵的糖类；柠檬酸钠、柠檬酸铁铵和去氧胆酸钠可抑制革兰氏阳性菌的生长；中性红为pH指示剂，发酵乳糖产酸的细菌菌落为红色，不发酵乳糖的细菌菌落为无色；琼脂是培养基的凝固剂。
三、培养基配方（g/L）
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牛肉粉 |
9.5 |
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蛋白胨 |
10.0 |
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乳糖 |
10.0 |
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柠檬酸钠 |
20.0 |
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柠檬酸铁铵 |
2.0 |
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去氧胆酸钠 |
5.0 |
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中性红 |
0.02 |
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琼脂 |
13.0 |
| pH值7.3±0.2 | 25℃ |
四、试验方法
1、称取本品69.52g，加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中，煮沸1分钟，冷至50℃左右时，倾入无菌平皿中，无需高压灭菌。
2、制备质控菌液，接种到培养基上。
3、放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。
五、结果观察与解释
接种以下质控菌株，放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
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福氏志贺氏菌 |
ATCC 12022 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色透明菌落 |
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鼠伤寒沙门氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
无色透明菌落 |
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大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
<10% |
+/﹣ |
粉红色菌落，有胆盐沉淀环 |
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粪肠球菌 |
ATCC 29212 |
100-1000 |
/ |
- |
抑制 |
去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂培养基微生物质控结果：
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福氏志贺氏菌 无色透明菌落 |
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鼠伤寒沙门氏菌 无色透明菌落 |
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大肠埃希氏菌 粉红色菌落，有胆盐沉淀环 |
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粪肠球菌 抑制 |
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