一、试验用途
该培养基主要用于单增李斯特氏菌增菌培养。
二、检验原理
胰蛋白胨、大豆蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂。
三、培养基配方(g/L)
大豆蛋白胨 |
3.0 |
胰蛋白胨 |
17.0 |
酵母浸粉 |
6.0 |
葡萄糖 |
2.5 |
氯化钠 |
5.0 |
磷酸氢二钾 |
2.5 |
pH值7.3±0.1 |
25℃ |
四、试验方法
1.称取本品3.6g,加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中,分装试管,每支10ml,121℃高压灭菌15分钟,备用;
2.将质控菌株稀释至合适梯度,用移液枪吸取指控菌种100微升加入试管中;
3.将接好菌种的试管放置于30±1℃需氧环境中培养24-48小时。
五、实验结果
接种以下质控菌株,放置在30±1℃培养24-48h。
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
指控结果 |
其他特征 |
单增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
10-100 |
TSA |
半定量 |
混浊度2 |
/ |
英诺克李斯特氏菌 |
ATCC33090 |
10-100 |
TSA |
半定量 |
混浊度2 |
/ |
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉汤实验结果如下图:
a:单增李斯特氏菌; b:英诺克李斯特氏菌; c:空白对照
六、注意事项
1.该菌营养要求不高,兼性厌氧,最适在含有CO2的微需氧环境中生长,生长温度范围—1.5℃-45℃,该培养基的适宜培养温度为30±1℃。
2.单增李斯特氏菌有时生长缓慢,培养时间应为24-48小时。
3.该培养基仅能作为单增李斯特氏菌的增菌培养,要进一步确认是否是单增李斯特氏菌,还需作进一步生化实验确认。
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