一、试验原理
MC培养基是一种用于食品中嗜热链球菌总数测定的培养基。
其所含大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源；碳酸钙可与微生物发酵代谢过程中产生的酸起反应，形成中性化合物和二氧化碳，防止培养基变酸，并初步辨别产酸菌；琼脂是培养基的凝固剂；中性红为pH 指示剂。
二、培养基配方（g/L)
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成分 |
含量（g/L） |
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大豆蛋白胨 |
5.0 |
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牛肉浸粉 |
3.0 |
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酵母浸粉 |
3.0 |
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葡萄糖 |
20.0 |
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乳糖 |
20.0 |
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碳酸钙 |
10.0 |
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琼脂 |
15.0 |
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中性红 |
0.05 |
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pH值6.0±0.1 25℃ |
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三、试验方法
1.称取本品80.0g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，并倒平板备用；
2.将质控菌株稀释至合适梯度，用移液枪吸取100微升涂布于MC平板，并用MC平板做参比培养基；
3.将涂布好的平板放置于36±1℃需氧环境中培养48±2小时。
四、实验结果与解释
接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养48±2小时。
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU) |
参比或计数培养基 |
方法 |
质控结果 |
其他特征 |
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嗜热链球菌 |
IFFI6038 |
20-200 |
MC培养基 |
定量 |
PR≥0.7 |
边缘光滑红色中等偏小菌落，背面粉红色 |
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嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
20-200 |
MC培养基 |
定量 |
PR≥0.7 |
淡粉色菌落，有明显溶钙环 |
嗜酸乳杆菌在生长发酵过程中可产生大量乳酸，故可与碳酸钙发生反应生成明显溶钙环；而嗜热链球菌在发酵过程中也可产生L-乳酸和叶酸，与碳酸钙发生反应生成较微弱溶钙环。结果如图一。
图一
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